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　　干貨分享：細胞培養的血清 血清解凍滅活等問(wèn)題

　　細胞培養基的配制：

　　細胞培養 液中添加的血清有牛血清、馬血清、人血清等，其中牛血清是zui常用的血清，分為胎牛血清和新生小牛血清。胎牛血清是從母牛破腹取出的胎牛中分離出的血清，價(jià)格昂貴。新生小牛血清是從剛出生的尚未哺乳的小牛中分離出來(lái)的血清，如廠(chǎng)家能做到這一點(diǎn)，新生小牛血清的質(zhì)量與胎牛血清的質(zhì)量相差不大。如小牛出生后已哺乳，從這種小牛中取出的血清中可能含有較多的生物活性物質(zhì)，其質(zhì)量明顯不如前兩種。

　　血清的質(zhì)量，種類(lèi)及使用的濃度都有可能影響細胞的生長(cháng)，而不同批次的血清支持細胞生長(cháng)的能力也不同，尤其是對克隆 細胞的生長(cháng)，某些批次血清可能含有毒性或抑制細胞生長(cháng)的物質(zhì)。注意以下幾點(diǎn)：

　　(1)需要長(cháng)期保存的血清必須儲存于-20℃或-80℃低溫冰箱 中。4℃冰箱中保存時(shí)間切勿超過(guò)1 個(gè)月。由于血清結冰時(shí)體積會(huì )增加約10%，因此，血清在凍入低溫冰箱前，必須預留一定體積空間，否則易發(fā)生污染或玻璃瓶?jì)隽选?/p>

　　(2)BUNSEN本生提供的血清為無(wú)菌，無(wú)需再過(guò)濾除菌。如發(fā)現血清有懸浮物，則可將血清加入培養液內一起過(guò)濾，切勿直接過(guò)濾血清。否則會(huì )導致?tīng)I養物質(zhì)的流失!

　　(3)瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法：-20 ℃或 -80 ℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1 天。然后移入室溫，待全部溶解后再分裝。在溶解過(guò)程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。切勿直接將血清從-20 ℃進(jìn)入37℃解凍，這樣因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現沉淀。影響使用效果!

　　(4)熱滅活是指56℃, 30 分鐘加熱已*解凍的血清。加熱過(guò)程中須規則搖晃均勻。此熱處理的目的是使血清中的補體成分(complement )滅活。除非必須，一般不建議作此熱處理，因為熱處理會(huì )造成血清沉淀物顯著(zhù)增多，而且還會(huì )影響血清的質(zhì)量。補體參與反應有：細胞毒作用, 平滑肌細胞收縮, 肥大細胞和血小板釋放組胺, 增強吞噬作用, 促進(jìn)淋巴細胞和巨噬細胞發(fā)生化學(xué)趨化和活化。Cyagen提供的血清是經(jīng)過(guò)嚴格處理可以直接使用，不需要特殊的處理，就能夠維持良好的支持效果。

　　(5)切勿將血清在37℃放置太久，否則血清會(huì )變得渾濁，同時(shí)血清中的有效成分會(huì )破壞而影響血清質(zhì)量。

　　(6)血清中的沉淀物

　　絮狀物：主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成，這些絮狀物不會(huì )影響血清本身的質(zhì)量?？捎秒x心3000rpm, 5 分鐘去除，也可不用處理。顯微鏡下“小黑點(diǎn)"：經(jīng)過(guò)熱處理過(guò)的血清，沉淀物的形成會(huì )顯著(zhù)增多。有些沉淀物在顯微鏡下觀(guān)察象“小黑點(diǎn)"，常誤認為血清受污染。一般情況下，此小黑點(diǎn)不會(huì )影響細胞生長(cháng)。

　　血清  本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承：遵紀守法，嚴于律己，寬仁以待，敢于承擔的企業(yè)精神作為標準，以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護和拓展市場(chǎng)，較大限度的滿(mǎn)足客戶(hù)的需求。與客戶(hù)的共贏(yíng)，是我們的發(fā)展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作，共創(chuàng )美好的未來(lái)。