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人白細胞介素21(IL-21)酶聯(lián)免疫分析試劑盒

  • 產(chǎn)品型號:BS-1648
  • 產(chǎn)品時(shí)間:2022-12-15
  • 簡(jiǎn)要描述:人白細胞介素21(IL-21)酶聯(lián)免疫分析試劑盒本生生物公司供應:ELISA試劑盒,熒光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量離心管,進(jìn)口凍存管,細胞培養皿,培養板,培養瓶,吸頭,儀器及手套,色譜耗材,針頭過(guò)濾器。
  • 產(chǎn)品簡(jiǎn)介

人白細胞介素21(IL-21)酶聯(lián)免疫分析試劑盒
本試劑盒僅供研究使用。
檢測范圍:96T
0.6 U/L -16 U/L
使用目的:
本試劑盒用于測定人白細胞介素21(IL-21)含量。實(shí)驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人白細胞介素21(IL-21)水平。用純化的人白細胞介素21(IL-21)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入白細胞介素21(IL-21),再與 HRP標記的白細胞介素21(IL-21)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物 TMB顯色。TMB在   HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的過(guò)白細胞介素21(IL-21)呈正相關(guān)。用酶標儀在  450nm波長(cháng)下測定吸光度(OD值),通過(guò)標準曲線(xiàn)計算樣品中人白細胞介素21(IL-21)濃度。
人白細胞介素21(IL-21)酶聯(lián)免疫分析試劑盒組成


標本要求
1.標本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻進(jìn)行,提取后應盡快進(jìn)行實(shí)驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因   NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
1.  標準品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑藴势芬恢?,用?hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。


2.  加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣 50µl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl,然后再加待測樣品 10µl(樣品最終稀釋度為 5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將 30倍濃縮洗滌液用蒸餾水  30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置 30秒后棄去,如此重復 5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑 50µl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10.終止:每孔加終止液    50µl,終止反應(此時(shí)藍色立轉黃色)。
11.測定:以空白空調零,450nm波長(cháng)依序測量各孔的吸光度(OD 值)。測定應在加終止液后 15分鐘以?xún)冗M(jìn)行。
人白細胞介素21(IL-21)ELISA試劑盒操作程序總結:


計算
以標準物的濃度為橫坐標, OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線(xiàn),根據樣品的OD值由標準曲查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與  OD值計算出標準曲線(xiàn)的直線(xiàn)回歸方程式,樣品的 OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實(shí)際濃度。
注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡 15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開(kāi)封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會(huì )有結晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時(shí)間最好控制在 5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4.雞過(guò)氧化氫酶(CAT)酶聯(lián)免疫分析 試劑盒請每次測定的同時(shí)做標準曲線(xiàn),最好做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過(guò)高(樣本  OD值大于標準品孔第一孔的 OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時(shí)請最后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
10.如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準。
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:2-8℃。
2.有效期:6個(gè)月

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