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BUNSEN本生:ELISA試劑實(shí)驗細節盤(pán)點(diǎn)
ELISA試劑盒細節盤(pán)點(diǎn)
1. 樣本收集
每個(gè)標本量收集體積=100ulx檢測指標,如要做復孔,標本量收集體積=10Oul×檢測指標×2。對收集后當天進(jìn)行檢測的標本,儲存在4℃備用,如有特殊原因需要周期收集標本,將標本及時(shí)分裝后放在-20°℃或-70°℃條件下保存,避免反復凍融。標本2-8℃可保存48小時(shí),-20°℃可保存1個(gè)月。-70度可保存6個(gè)月。部分激素類(lèi)標本需添加抑肽酶。如需離心的樣本,離心轉速不宜過(guò)高(2000~3000)
2. ELISA加樣
加樣品時(shí),單孔用量要求: ≥50ul/指標,如需要做2個(gè)復孔則血量≥100ul/指標。如果樣本量不充足,具體用量可咨詢(xún)您的專(zhuān)屬銷(xiāo)售。
3. 樣品捕獲抗體孵育
37C恒溫孵育,避免溫度變化過(guò)大
4. 洗滌
機洗: 將25x×洗滌緩沖液稀釋成1×,1×洗滌緩沖液洗三次,每次加300uL浸泡60s手洗:手洗次數應比機洗次數多,浸泡時(shí)間也應適當延長(cháng)
手洗容易導致吸附在酶標板底部的試劑脫落,從而導致結果偏小,手洗次數過(guò)多也會(huì )影響實(shí)驗結果,建議機洗
5. 底物顯色(TMB顯色) 孵育
TMB在使用前應放置室溫平衡30分鐘,加的量為A、B各50uL
6. ELISA終止液終止反應
加完TMB終止液應讓其混勻再在酶標儀上讀數
7. 酶標儀讀數
在450nm波長(cháng)處測定O.D值
8. 根據O.D值計算樣本濃度
使用軟件擬合標準曲線(xiàn),根據標準曲線(xiàn)的擬合度(r或R2)以及殘差平方和(s)選擇合適的曲線(xiàn)。
ELISA試劑盒本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承:遵紀守法,嚴于律己,寬仁以待,敢于承擔的企業(yè)精神作為標準,以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護和拓展市場(chǎng),較大限度的滿(mǎn)足客戶(hù)的需求。與客戶(hù)的共贏(yíng),是我們的發(fā)展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作,共創(chuàng )美好的未來(lái)。
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