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實(shí)驗耗材、可拆卸酶標板使用的具體步驟
酶標板是酶聯(lián)免疫反應實(shí)驗中的重要載體工具,分為可拆和不可拆的,一般用的較多的是可拆的酶標板。在使用時(shí),按照以下步驟操作:
1、加樣品:將標本稀釋液加到包被板內,將需要檢測的血清用PBS或生理鹽水按照1:20的比例稀釋后取10ul加入到酶標板的反應孔內。
2、加對照:加入陰性對照3孔,陽(yáng)性對照1孔,還有100ul的對照血清。
3、進(jìn)行溫育:將反應板震蕩,使樣品充分的混勻,置于37℃的溫箱或者水浴反應20分鐘的時(shí)間。
4、洗板:用蒸餾水將洗滌液15ml稀釋至300ml的體積。手洗的時(shí)候應該將反應板孔內的容物傾出,將洗滌液注滿(mǎn)反應孔的位置,然后放置30秒鐘后用力甩去,這樣的動(dòng)作重復5次后開(kāi)始拍干。機洗需要進(jìn)行5次,每孔注入洗滌液200ul或者可以注滿(mǎn),然后停留30秒鐘后吸盡拍干。
5、加酶標工作液:在每孔內加入100ul的酶標工作液,放置到37℃的溫箱中,反應20分鐘后洗板5次,洗板的操作和上述步驟4是相同的。
6、這是反應的最后一步,就是顯色和終止反應:將底物50ul加到反應孔內,37℃條件下避光顯色10分鐘的時(shí)間。在每孔內加入終止液50ul混勻用以終止反應。
以上是酶標板使用的具體步驟,在使用前可使用后要經(jīng)過(guò)消毒和清洗處理,消毒方式需認真閱讀說(shuō)明書(shū)進(jìn)行選擇,要注意有些材料是不能進(jìn)行高溫消毒的。
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