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教您怎么完善ELISA試劑盒試驗中的過(guò)錯?2023資料已更新
ELISA操作過(guò)程多,新手操作難免會(huì )有過(guò)錯。而這些過(guò)錯許多是由細節不夠好形成的,減少過(guò)錯的辦法有許多,比方做試驗時(shí)少說(shuō)話(huà),避免唾液掉進(jìn)酶標條中。當然,大家還要學(xué)會(huì )自己開(kāi)掘問(wèn)題,找出原因。BUNSEN本生教您怎么完善ELISA試劑盒試驗中的過(guò)錯?
1,評價(jià)試劑的實(shí)用性,試劑的安穩與否,對準確率的凹凸到頭重要。在試劑啟用前,應進(jìn)行陰、陽(yáng)對照及樣品重復比照試驗,判定試劑符合要求后方可運用。
2,操作前仔細閱讀說(shuō)明書(shū),嚴厲按照說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行規范化操作。不同批號的試劑不行混用。值得改善的地方,重復試驗確認建立后才能改善,比方洗板次數的掌握等。
3,加樣要準確、快速。加樣不準確,酶生成物的量不能確認,直接影響顯色成果。別的,顯色的深淺及A值的測定與加入顯色劑和停止液的量有關(guān),所以加樣應慎重。要求在必定時(shí)刻內加樣完畢的試驗,如果加樣緩慢,便出現誤差,而且試劑長(cháng)期暴露在外,尤其室溫過(guò)高時(shí),保存期會(huì )縮短乃至失效。
4,檢驗技師應具有從事試驗室操作的基本素質(zhì)和實(shí)踐經(jīng)驗。能熟練操作試驗儀器、器械,具有必定總結和剖析問(wèn)題的才能,對試驗中出現的意外狀況能及時(shí)妥善解決。
5,運用校對過(guò)的微量移液器,排除自然誤差。移液器準確與否對定量檢測尤為重要。
6,嚴格掌握顯色時(shí)刻,顯色時(shí)刻過(guò)短,加入停止液反響停止后,底物結合物的量過(guò)少,易出現假陰性。超過(guò)顯色要求時(shí)刻后顯色,應判為假陽(yáng)性,這或許與試劑自身有關(guān)。加顯色劑后當即顯色,不行報陽(yáng)性,這或許是本底顯色的成果。
7,洗刷*,洗板不*,ELISA試劑盒酶結合物本底顯色會(huì )出現假陽(yáng)性。別的,洗刷液要新鮮,現用現配,陳腐的洗刷液會(huì )出現本底增高現象,也或許出現假陽(yáng)性。
8,嚴控反響時(shí)刻,反響時(shí)刻過(guò)長(cháng),酶失活;反響時(shí)刻過(guò)短,酶結合物不能與血清中的微生物抗原抗體充沛結合,生成物結構松散不牢固,容易洗掉,都或許形成假陰性。
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