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　　實(shí)驗干貨——PCR試劑盒注意事項與原則

　　PCR試劑盒注意事項：

　?、偌尤朐噭┑捻樞?，以保證所有反應板孔溫育的時(shí)間一樣。

　?、谑褂酶蓛舻乃芰先萜髋渲孟礈煲?。

　?、郯凑针u血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說(shuō)明書(shū)中標明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

　?、艿孜顰應揮發(fā)，避免長(cháng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對光敏感，避免長(cháng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗完成后應立即讀取OD值。

　?、菹礈?strong>酶標板時(shí)應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。

　?、奘褂靡淮涡缘奈^以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器 。

　?、邔?shí)驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。

　?、嘣噭礃撕炚f(shuō)明書(shū)儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過(guò)后的標準品應丟棄，不可保存。

　?、岵挥玫钠渌噭b好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

　　PCR試劑盒原則：

　?、僖镩L(cháng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。

　?、谝飻U增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長(cháng)至10kb的片段。

　?、垡飰A基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過(guò)多易出現非特異條帶。ATGC機分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

　?、鼙苊庖飪炔砍霈F二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會(huì )形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。

　?、菀?'端的堿基，特別是末及倒數第二個(gè)堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。

　?、抟镏杏谢蚰芗由虾线m的酶切位點(diǎn)， 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

　?、咭锏奶禺愋裕阂飸c核酸序列數據庫的其它序列無(wú)明顯同源性。

　　ELISA試劑盒 本生(天津)健康科技有限公司產(chǎn)品涵蓋有熒光定量PCR耗材(八聯(lián)管,單管,96孔板,384孔板,封板膜,輔助器等)，ELISA試劑盒，移液器吸嘴，離心管，凍存管，培養皿，培養板，培養瓶，吸頭，儀器及手套，培養基，抗體，血清，色譜耗材，針頭過(guò)濾器及實(shí)驗室常用耗材。 品種類(lèi)超過(guò)萬(wàn)種，廣泛應用于科研院校、中心實(shí)驗室、分子生物學(xué)等科研領(lǐng)域。

　　PCR試劑盒 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承：遵紀守法，嚴于律己，寬仁以待，敢于承擔的企業(yè)精神作為標準，以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護和拓展市場(chǎng)，較大限度的滿(mǎn)足客戶(hù)的需求。與客戶(hù)的共贏(yíng)，是我們的發(fā)展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作，共創(chuàng )美好的未來(lái)。