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凍存過(guò)的全血為什么不建議再拿來(lái)做ELISA實(shí)驗?
很多ELISA實(shí)驗新手客戶(hù)都會(huì )咨詢(xún)我司技術(shù)能否把全血提取出來(lái)放-70℃條件保存,等實(shí)驗開(kāi)展了(比如一個(gè)月左右的時(shí)間)再離心全血取血清或者血漿做ELISA實(shí)驗?這種做法我司技術(shù)都是持反對建議的。與此同時(shí),也是明確要求我司銷(xiāo)售人員在與客戶(hù)售前溝通時(shí)建議老師全血樣本提取好了應該及時(shí)離心出血清或者血漿。并要求-70℃條件下保存,如果一個(gè)月左右可以開(kāi)展實(shí)驗可以-20℃保存,期間不能反復凍融。至于凍存后的全血不可以再提取血清、血漿樣本來(lái)做elisa的具體原因如下:
1.全血凍存后解凍,用常規離心方式提取血清仍然是可以的,不利的一點(diǎn)是,伴隨凍融的過(guò)程,會(huì )出現比較嚴重的溶血事件。而后提取出來(lái)的血清能否做elisa,主要取決于溶血程度、你所要檢測的目標蛋白的性質(zhì)及你實(shí)驗的目的。
2.溶血釋放的胞內組分往往容易影響本底,甚至出現假陽(yáng)性;而蛋白酶的釋放可能導致目的蛋白的降解影響結果;目的蛋白的大小、穩定性、特異性(相對抗體而言)又影響其自身與酶標板的吸附、自身降解、自身與抗體的結合率等等。以上各種不確定性因素存在下,如果你只是對血清中某種血清蛋白做定性檢測的話(huà),做elisa應該問(wèn)題不大;若是定量分析的話(huà),從可靠性的角度上看,不建議該做法。
elisa試劑盒需求多少血樣?
1.請問(wèn)每孔需求多少u(mài)l血清,其他,比如說(shuō)需求100ul血清,那么需求留取多少人抗凝血呢?一般常用的ELISA試劑盒有96孔,根據試驗需求做復孔,陰性、陽(yáng)性對照組。復孔一般設3孔。
2.試驗都是取5ML的抗凝血離心后取血清,能夠得到許多血清。然后分裝到EP管凍存,然后取一部分來(lái)做ELISA試劑盒,其他的做其他試驗用。
3.需求的樣本量取決于你的檢查項目,有些檢查項目需求血清做1:100稀釋,乃至是更高的稀釋度,那么幾微升血樣就夠了,有些項目只能做較低的稀釋,乃至不稀釋,這么的話(huà)每孔會(huì )需求100ul分配.
關(guān)于抗凝血和得到的聯(lián)絡(luò ),大致上份額是1毫升全血能夠得到500ul血清或血漿.我血樣是現已把細胞分離出來(lái)了的,現要提DNA,試劑盒上說(shuō)"取0.3-0.5ml全血到1ml純化樹(shù)脂中",應取多少μl細胞?
elisa試劑盒本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承:遵紀守法,嚴于律己,寬仁以待,敢于承擔的企業(yè)精神作為標準,以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護和拓展市場(chǎng),較大限度的滿(mǎn)足客戶(hù)的需求。與客戶(hù)的共贏(yíng),是我們的發(fā)展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作,共創(chuàng )美好的未來(lái)。
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