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本生歸納總結：抗原抗體反應原理特點(diǎn)
抗原抗體反應是指抗原與相應抗體之間所發(fā)生的特異性結合反應。這種反應既可在機體內進(jìn)行，也可以在機體外進(jìn)行?？乖贵w反應的過(guò)程是經(jīng)過(guò)一系列的化學(xué)和物理變化，包括抗原抗體特異性結合和非特異性促凝聚兩個(gè)階段，以及由親水膠體轉為疏水膠體的變化。
由于抗體主要存在于血清中，在抗原或抗體檢測中多以血清為試驗材料，故將體外抗原抗體的免疫學(xué)反應也稱(chēng)作血清學(xué)反應(serological reaction)。該反應既可用已知的抗原檢測未知的抗體，這是臨床上常用的血清學(xué)診斷方法;也可用已知的抗體檢測未知的抗原，如微生物及其代謝產(chǎn)物、激素、藥物鑒定等的檢測
抗原抗體反應反應特點(diǎn)
抗原抗體反應的特點(diǎn)主要有四性：即特異性、比例性、可逆性，階段性。
特異性: 是抗原抗體反應的最主要特征，這種特異性是由抗原決定簇和抗體分子的超變區之間空間結構的互補性確定的。這種高度的特異性在傳染病的診斷與防治方面得到有效的應用。隨著(zhù)免疫學(xué)技術(shù)的發(fā)展進(jìn)步，還將在醫學(xué)和生物學(xué)領(lǐng)域得到更加深入和廣泛的應用，比如腫瘤的診斷和特異性治療等。
比例性: 是指抗原與抗體發(fā)生可見(jiàn)反應需遵循一定的量比關(guān)系，只有當二者濃度比例適當時(shí)才出現可見(jiàn)反應，在抗原抗體比例相當或抗原稍過(guò)剩的情況下，反應最，形成的免疫復合物沉淀最多、最大。而當抗原抗體比例超過(guò)此范圍時(shí)，反應速度和沉淀物量都會(huì )迅速降低甚至不出現抗原抗體反應。
可逆性: 是指抗原抗體結合形成復合物后，在一定條件下又可解離恢復為抗原與抗體的特性。由于抗原抗體反應是分子表面的非共價(jià)鍵結合，所形成的復合物并不牢固，可以隨時(shí)解離，解離后的抗原抗體仍保持原來(lái)的理化特征和生物學(xué)活性。
階段性：抗原抗體反應可分為兩個(gè)階段，第一個(gè)階段為抗原抗體的特異性結合階段，此階段是抗原與抗體間互補的非共價(jià)結合，反應迅速，可在數秒鐘至數分鐘內完成，一般不出現肉眼可見(jiàn)的反應現象。第二個(gè)階段為可見(jiàn)反應階段，是小的抗原抗體復合物間靠正、負電荷吸引形成較大復合物的過(guò)程。此階段反應慢，需要時(shí)間從數分鐘、數小時(shí)至數日不等，且易受多種因素和反應條件的影響 。
本生抗原抗體反應影響因素
電解質(zhì)：抗原和抗體通常為蛋白質(zhì)分子，等電點(diǎn)分別為pH 3～5和pH 5～6，在中性或:弱堿性的環(huán)境中，表面均帶負電荷，適當濃度的電解質(zhì)會(huì )使他們失去一部分負電荷而相互結合，出現肉眼可見(jiàn)的凝集或沉淀現象：在抗原抗體反應中，常用0.85%的NaCI溶液或各種緩沖液作為抗原、抗體的稀釋液，以提供適當濃度的電解質(zhì)。
溫度：抗原抗體反應必須在適宜的溫度中進(jìn)行，一般為15～40℃，通常最適為37℃。一定范圍內，溫度升高，可促進(jìn)抗原抗體分子問(wèn)的碰撞機會(huì )，加速抗原抗體復合物的形成，加快可見(jiàn)反應的速度，若溫度高于56℃，可導致已結合的抗原抗體再解離，甚至變性或破壞;溫度越低，結合速度越慢，但結合牢固，易于觀(guān)察。某些特殊的抗原抗體反應，對反應溫度有特殊要求，如冷凝集素在4℃左右與紅細胞結合最好，20℃以上反而解離。
酸堿度：抗原抗體反應必須在合適的酸堿度環(huán)境中進(jìn)行，pH過(guò)高或過(guò)低都將影響抗原:抗體的理化性質(zhì)，抗原抗體反應的最適酸堿度為pH 6～8。此外，當pH達到或接近顆粒性抗原的等電點(diǎn)時(shí)，即使沒(méi)有相應抗體存在時(shí)，也會(huì )引起抗原非特異性凝集，即自凝，造成假陽(yáng)性反應，嚴重影響試驗的可靠性。
抗原抗體反應反應原理
抗體能特異性地識別相應的抗原，并與之結合。這種結合在體外也能發(fā)生，這種特性就是許多免疫檢測方法的基礎?？乖c抗體相互作用是非共價(jià)的，可逆的，其特性符合許多化學(xué)反應的基本原理。但因為抗體分子的結構特點(diǎn)，以及抗原分子結構的多樣性，使抗原抗體結合反應表現出復雜性 。
交叉反應
抗體特異性與交叉反應：抗體是特異的。只與相應抗原反應。實(shí)際制備的抗體卻常有非特異性反應，這是因為抗原不純造成的。多組分抗原之間存在共同的抗原決定簇，或者兩個(gè)抗原決定簇結構類(lèi)似能與同一抗體結合，均可出現抗體與異源抗原的交叉反應。用瓊脂雙擴散能簡(jiǎn)便直觀(guān)地反映不同抗原與同一抗血清，或不同抗血清與同一抗原的交叉反應。
本生抗原抗體反應應用
抗原：免疫動(dòng)物是制備抗血清的第—步。免疫所用的抗原可用病毒、細菌或者其他蛋白質(zhì)抗原，如果使用半抗原如小分子激素等，必須與大分子載體連接?？乖挠昧恳暱乖N類(lèi)及動(dòng)物而異，—次注射小鼠可以少至幾個(gè)微克，免、羊甚至更大的動(dòng)物每次注射的量就相應增加，從幾百μg/次至幾mg/次。
佐劑及乳化：佐劑可以幫助抗原在注射部位緩慢釋放，以增加免疫刺激的效果。佐劑有和不佐劑之分。全佐劑加有滅活的分枝桿菌(如卡介苗)或棒狀桿菌。福氏佐劑可從試劑公司購買(mǎi)，也可用羊毛脂和石蠟油按1：2—4混合自行制備。佐劑與抗原按1：1的比例混合乳化為均勻的乳液，放置后不會(huì )發(fā)生油水分離。
免疫動(dòng)物：常用于制備抗血清的動(dòng)物如豚鼠、家兔、小鼠、大鼠等，如果大量生產(chǎn)可用動(dòng)物羊、馬等，動(dòng)物接受免疫的乳液量小鼠為1.0—2.0 mL，家兔為2—4mL?？乖庖邉?dòng)物的途徑取決于動(dòng)物種類(lèi)、抗原特性和是否使用佐劑。腹腔注射(i.p)，肌肉注射(i.m)，皮內注射(i.d.)和皮下注射(s.c.)適合于任何抗原，這些途徑主要刺激局部淋巴結發(fā)生免疫應答，初次免疫和免疫加強注射均可使用。靜脈注射(i.v.)則只適合于可溶性抗原及分散的單細胞懸液，且不能使用佐劑，其誘發(fā)的免疫應答主要發(fā)生在脾臟。此外，在單克隆抗體制備時(shí)，亦可用脾臟直接注射或體外免疫方法，尤其對微量抗原比較實(shí)用。體外免疫方法也常用于人源單克隆抗體的制備。體外免疫時(shí)將脾細胞或外周血淋巴細胞(包括B細胞，T細胞及抗原遞呈細胞)與抗原一起作體外培養，然后再與骨髓瘤細胞融合。初次免疫后要經(jīng)過(guò)2—3次以上的免疫加強以保證能形成較高水平的IgG抗體。兩次免疫注射之間的時(shí)間間隔，一般3—4周比較適合大部分動(dòng)物，小動(dòng)物可間隔10—14d，大動(dòng)物則在2月左右。在免疫加強最后一次注射后的一周內采集抗血清，可獲得高水平的抗體 。
抗原抗體 本生生物公司供應：ELISA試劑盒,動(dòng)物血清,熒光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量離心管,進(jìn)口凍存管,細胞培養皿,培養板,培養瓶,進(jìn)口吸頭,儀器及手套,色譜耗材,針頭過(guò)濾器等。
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