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如何選擇ELISA檢測試劑盒進(jìn)行各項實(shí)驗條件?
更新時(shí)間:2022-11-24瀏覽:1056次

  如何選擇ELISA檢測試劑盒進(jìn)行各項實(shí)驗條件?


  使用ELISA檢測試劑盒進(jìn)行試驗時(shí),應分別以陽(yáng)性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應作一式二份,以保證實(shí)驗結果的準確性。有時(shí)本底較高,說(shuō)明有非特異性反應。

  在ELISA中,進(jìn)行各項實(shí)驗條件的選擇是很重要的,其中包括:

  固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯yixi、聚苯yixi、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯yixi凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗條件下進(jìn)行反應,觀(guān)察其顯色反應是否均一性,據此判明其吸附性能是否良好。

  包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗條件相同時(shí),觀(guān)察陽(yáng)性標本的OD值。選擇OD值大而蛋白量少的濃度。對于多數蛋白質(zhì)來(lái)說(shuō)通常為1~10μg/ml。

  本生技術(shù)提醒:除此之外還要注意以下事項:

  1.確定ELISA檢測試劑盒在有效期內;

  2.仔細閱讀說(shuō)明書(shū);

  3.按說(shuō)明書(shū)確定所有試劑齊全(數量、體積);

  4.標本制備要規范,每份標本體積要按2-3個(gè)復孔以上的量制備,盡量分裝做備份。短期內無(wú)法實(shí)驗者,注意低溫保存;

  5.根據檢測標本數量確定所需試劑的量;

  6.準備好所有實(shí)驗額外所需物品,如試管、吸頭、移液器、離心機等;

  7.按說(shuō)明書(shū)將所用試劑平衡至室溫,配制所需試劑。

  ELISA檢測試劑盒天津本生既能滿(mǎn)足研發(fā)類(lèi)客戶(hù)對產(chǎn)品種類(lèi)、包裝的特殊要求,也能滿(mǎn)足生產(chǎn)型企業(yè)從小試、中試到規?;a(chǎn)各個(gè)階段的綜合需求。產(chǎn)品涵蓋有熒光定量PCR耗材(八聯(lián)管,單管,96孔板,384孔板,封板膜,輔助器等),ELISA試劑盒,移液器吸嘴,離心管,凍存管,培養皿,培養板,培養瓶,吸頭,儀器及手套,培養基,抗體,血清,色譜耗材,針頭過(guò)濾器及實(shí)驗室常用耗材。 品種類(lèi)超過(guò)萬(wàn)種,廣泛應用于科研院校、中心實(shí)驗室、分子生物學(xué)等科研域。

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